Presentaciones atípicas de histoplasmosis / Atypical presentations of histoplasmosis

La histoplasmosis es una enfermedad granulomatosa, producida por Histoplasma capsulatum. Causa un amplio espectro de manifestaciones clínicas, la más frecuente es la pulmonar. En algunos casos se presentan formas diseminadas con afectación de uno o múltiples órganos, de características atípicas difíciles de reconocer. La patogenia de esta enfermedad es igual a la de tuberculosis y se ha descrito coinfección. Se reportan tres casos de histoplasmosis de presentación infrecuente: ancianos, coinfección con micobacterias, localizaciones atípicas y revisión de la literatura. El primer caso fue el de un paciente de 19 años de edad con absceso cerebral. El segundo y tercer caso correspondieron a personas mayores de 60 años, con coinfección por Histoplasma capsulatum y Mycobacterium sp, de presentación articular y enfermedad ginecológica, respectivamente. En Venezuela, zona endémica para esta micosis, el médico está obligado a tener un alto índice de sospecha acerca de la misma, teniendo en cuenta factores como la edad y la epidemiología. (Acta Med Colomb 2015; 40: 254-259).

Histoplasmosis is a granulomatous disease caused by Histoplasma capsulatum. It causes a wide spectrum of clinical manifestations, being the pulmonary the most common one. In some cases disseminated forms with involvement of one or multiple organs are manifested with atypical characteristics difficult to recognize. The pathogenesis of this disease is equal to that of TB and co-infection has been described. Three cases of infrequent presentation of histoplasmosis: elderly, co-infection with mycobacteria, atypical presentations and review of the literature are presented. The first case involved a 19-year-old with cerebral abscess. The second and third cases were for people over 60, co-infected with Histoplasma capsulatum and Mycobacterium sp, with joint involvement and gynecological disease, respectively. In Venezuela, endemic area for histoplasmosis, the doctor is required to have a high index of suspicion about this entity, taking into account factors such as age and epidemiology. (Acta Med Colomb 2015; 40: 254-259).

Paracoccidioidomicosis: clínica, epidemiología y tratamiento / Paracoccidioidomicosis: clinical considerations, epidemiology and treatment

Objetivo: caracterizar desde el punto de vista clínico, epidemiológico y de tratamiento, los pacientes con diagnóstico de paracoccidioidomicosis evaluados en la Consulta Externa de la Sección de Micología Médica del IMT-UCV y procedentes de otros hospitales del área de la Gran Caracas, cuyas muestras fueron procesadas en dicha Sección, entre los años 2001-2011. Métodos: estudio descriptivo de registros, donde se tomaron en cuenta las historias de los pacientes con diagnóstico de paracoccidioidomicosis. Resultados: la relación hombre:mujer obtenida fue de 6,5:1, sólo el 29,16% de los pacientes tenían ocupaciones agrícolas. Los síntomas más frecuentes fueron tos (50%) y pérdida de peso (45,06%) y los signos más comunes fueron lesiones en orofaringe (53,6%) y adenopatías (27,2%). 7,65% cursaron concomitantemente con infección por VIH/SIDA, 5,61% con tuberculosis y 6,63% con histoplasmosis. En cuanto al diagnóstico, el examen directo fue positivo en 87,5% de los casos, el cultivo en el 62,90% y la serología en el 88,46%. La mortalidad general fue de 4,11%. Discusión: La paracoccidioidomicosis es una enfermedad que puede ocurrir en pacientes inmunocompetentes e inmunocomprometidos; tiende a observarse ahora con mayor frecuencia en los pacientes con SIDA. El número de casos entre los pacientes del sexo femenino ha aumentado. La investigación acerca del lugar de origen, de la procedencia y la ocupación del paciente es importante a la hora de plantearse el diagnóstico. Esto debe ser tomado en consideración en un país endémico como el nuestro. Su diagnóstico es relativamente fácil en manos de personal entrenado.

Objective: to characterize from the clinical, epidemiological and treatment viewpoints, patients diagnosed with paracoccidioidomycosis and evaluated in the outpatient clinic of the Medical Mycology Section, at the IMT-UCV and from other hospitals in the greater Caracas area, whose samples were processed in this section between 2001-2011. Methods: descriptive study of records, taking into account the histories of patients diagnosed with paracoccidioidomicosis. Results: the male:female ratio obtained was 6.5:1; only 29.16% of the patients had agricultural occupations. The most common symptoms were cough (50%) and weight loss (45.06%), and the most common signs were oropharyngeal lesions (53.6%) and adenopathy (27.2%). Concomitantly, 7.65% had HIV/AIDS infection, 5.61% tuberculosis and 6.63% histoplasmosis. In terms of diagnosis, the direct exam was positive in 87.5% of cases, the culture in 62.90% and serology in 88.46%. Overall mortality was 4.11%. Discussion: paracoccidioidomycosis is a disease that can occur in immunocompetent and immunocompromised patients; currently, it tends to appear more frequently in patients with AIDS. The number of cases among female patients has increased. Research about the place of birth, the origin and the occupation of the patient is important when considering the diagnosis; this should be taken into consideration in an endemic country like Venezuela. Its diagnosis is relatively easy in the hands of trained personnel.

Evaluación de la susceptibilidad a glicopéptidos en cepas de Staphylococcus aureus resistentes a oxacilina / Evaluation of susceptibility to glycopeptides in oxacillin resistant Staphylococcus aureus strains

Candida albicans y Candida dubliniensis presentan una estrecha relación filogenética. La similitud de estas especies puede hacer que en un laboratorio microbiológico se identifique en forma errónea C. dubliniensis como C. albicans. El objetivo de esta investigación fue evaluar diversos métodos fenotípicos para la diferenciación entre Candida dubliniensis y Candida albicans. Se utilizaron 6 cepas control de C. dubliniensis y una de C. albicans, provenientes de colecciones reconocidas y sometidas a genotipificación. También se utilizaron 70 aislados identificados como posibles C. albicans utilizando el medio CHROMagar Candida y el medio de bilis agar Feo. Los métodos evaluados fueron: agar Sabouraud dextrosa a 45°C, agar Sabouraud con NaCl al 6,5%, agar Tween 80, agar tabaco, agar Pal’s, agar tomate-zanahoria y aglutinación con partículas de látex (Bichro-Dubli Fumouze®). Encontramos que las técnicas más confiables para realizar la diferenciación fenotípica entre estas dos especies fueron: el agar tomate-zanahoria, el agar Pal’s, el agar tabaco y la aglutinación con partículas de látex (Bichro-Dubli Fumouze®). Además en este estudio, de los 70 aislados considerados como C. albicans, encontramos 1 (1.4%) posible Candida dubliniensis. Sin embargo, las pruebas de biología molecular son las más adecuadas para el diagnóstico certero de estas dos especies.

Candida albicans and Candida dubliniensis have a close phylogenetic relationship. The similarity between these species can cause a microbiology laboratory to identify C. dubliniensis erroneously as C. albicans. The objective of this research was to evaluate diverse phenotypic methods for differentiating between Candida dubliniensis and Candida albicans. Six control strains of C. dubliniensis and one of C. albicans from recognized collections were used and submitted to genotypification. Also, 70 isolates were used, identified as possible C. albicans utilizing CHROMagar Candida and bilis agar Feo mediums. The methods evaluated were: Sabouraud dextrosa agar at 45°C, Sabouraud agar with NaCl at 6.5%, Tween 80 agar, tobacco agar, Pal’s agar, tomato-carrot agar and agglutination with latex particles (Bichro-Dubli Fumouze®). It was found that the most reliable techniques for performing phenotype differentiation between these two species were tomato-carrot agar, Pal’s agar, tobacco agar and agglutination with latex particles (Bichro-Dubli Fumouze®). Of the 70 isolates considered to be C. albicans, one (1.4%) possible Candida dubliniensis was found. Nevertheless, molecular biology tests are the most appropriate means for achieving an accurate diagnosis of these two species.

Detección e identificación de Candida dubliniensis por métodos fenotípicos en estomatitis sub-protésica: reporte de un caso / Detection and identification of methods for phenotypic Candida dubliniensis in denture stomatitis: report of case

La Estomatitis Sub-Protésica es una afección comúnmente observada en sujetos portadores de prótesis dentales removibles. Son numerosos los reportes publicados en los que se asocia esta patología con la presencia de hongos del Género Candida, y particularmente con Candida albicans. No obstante, algunas cepas identificadas como C. albicans, pudieran no tratarse en realidad de este microorganismo sino de Candida dubliniensis, más aún si se toma en cuenta que ambas especies producen clamidoconidias. Es por ello que resulta necesario comparar distintos métodos fenotípicos que permitan diferenciar en buena medida a ambas especies. En este artículo se describe el caso de una paciente portadora de prótesis removible superior con diagnóstico clínico de Estomatitis Sub-Protésica, a quien se le tomó muestras del paladar afectado y de la prótesis implicada. Se emplearon diferentes métodos fenotípicos de identificación diferencial de ambas especies, entre estos: CHROMagar Candida, Agar tabaco, Agar Pal´s, Agar Tween 80, medio de tomate y zanahoria y de Agar Sabouraud con NaCl al 6,5% (P/V). También se realizaron la pruebas de termotolerancia a 45ºC, aglutinación en latex, así como la identificación a través del sistema ID 32C (bioMerieux). Una vez empleados los métodos antes mencionados, la especie encontrada en el paladar de la paciente fue C. dubliniensis, en tanto que la que se halló en la prótesis fue C. albicans, siendo esta la primera vez que se detecta e identifica en nuestro país a C.dubliniensis en pacientes que presentan esta patología bucal.

Denture stomatitis is a condition commonly observed in subjects with removable dentures. There are numerous reports published in which this disease is associated with the presence of fungi of the genus Candida, particularly Candida albicans. However, some strains identified as C. albicans, may not actually be this organism but Candida dubliniensis, especially if one takes into account that both species produce clamidoconidias. That is why it is necessary to compare different phenotypic methods to differentiate largely to both species. This article describes the case of a patient with upper removable prosthesis with a clinical diagnosis of Denture Stomatitis, whom he took samples of the palate is affected and the prosthesis involved. Different methods were used phenotypic differential identification of both species, among them: CHROMagar Candida Agar snuff, Pal's Agar, Tween 80 Agar, tomato and carrot medium, and Sabouraud Agar with 6.5% NaCl (P / V ). Also thermotolerance tests performed at 45 ° C, latex agglutination, and identification by ID 32C system (bioMerieux) were used. Once employed the above methods, the species found in the mouth of the patient was C. dubliniensis, whereas that was found in the prosthesis was C. albicans, marking the first time it is detected and identified in our country C.dubliniensis in patients with this oral pathology.

Estudio de Infecciones diseminadas por candida en pacientes con neutropenia febril asociada a enfermedades hemato-oncológicas / Study disseminated Candida infections in patients with febrile neutropenia associated with hemato-oncological diseases

Mundialmente, en las últimas dos décadas se ha observado un incremento en la frecuencia de las infecciones micóticas diseminadas, con alta morbi-mortalidad, particularmente importante en las infecciones por Candida. El objetivo es determinar la frecuencia de candidiasis diseminada, en pacientes con enfermedades hemato-oncológicas o aplasia medular que ingresaron a los servicios de medicina interna del hospital universitario de caracas, con fiebre y neutropenia, entre enero y septiembre de 2010, realizándose evaluación exhaustiva y tomándose muestras de sangre, además de otras muestras en caso de presencia de lesiones, para el diagnóstico micológico. Se evaluaron 48 pacientes en el período del estudio, diagnósticandose 21 casos (43,75%) de micosis diseminadas, catalogadas como infecciones probadas en 13 y probables en 8 casos. De las infecciones probadas 8 (38%) correspondieron a infecciones por Candida: en uno se aisló Candida albicans y en 7, Candida no albicans: 2 pacientes con candida tropicalis, 2 con candida glabatra y uno con candida guillermondii. Dos cepas fueron informadas como candida spp, y 5 por otros hongos. Las infecciones micóticas diseminadas contribuyen sustancialmente a la morbimortalidad de los pacientes con neutropenia, por lo tanto es fundamental la sospecha y diagnóstico temprano de estas entidades en los pacientes con cáncer de origen hematológico y aplasia medular.

Wordwide, there has been an increase in the incidence of disseminated fungal diseases during the last two decades, with high morbidity and mortality particularly importante in Candida infections. To determine the frequency of disseminated candidiasis in patients with hemato-oncological diseases or bone marrow aplasia and febrile neutropenia. A descriptive, prospective and analytical study was conducted. Patients with hemato-oncological diseases or bone marrow aplasia who were hospitalized at the internal medicine service of the hospital universitrio de caracas, with fever and neutropenia, between january and september, 2010 were included, making torough assessment and taking blook samples as well as other clinical specimen when other lesions were present, for mycological diagnosis. During the study period, 48 patients were evaluated. Twenty one cases were diagnosed (43.75%) as disseminated fungal disease. They were classified as proven in 13 cases and probable in 8. From the proven diseases, 8 (38%) corresponded to Candida infections: in one, Candida albicans was isolated and in 7, Candida non-albicans: 2 patients with Candida tropicalis were found, 2 with Candida glabrata and one with Candida guillermondii. Two were reported as Candida spp. In 5 patients other fungi were found. Dissemiated fungal infections substantially contribute to morbidity and mortality in neutropenic patients. For this reason, awareness and early diagnosis of this disease are crucial are crucial in patients with hematological cancer and bone marrow aplasis.

Estudio de casos de paracoccidioidomicosis infantil diagnosticados en el área de la Gran Caracas Venezuela / Study paracoccidioidomycosis diagnosed cases of childhood in the area of Greater Caracas Venezuela

La paracoccidioidomicosis pocas veces afecta niños y no es de denuncia obligatoria. Su verdadero impacto en la población infantil es desconocido. El objetivo fue determinar en número de casos de paracoccidioidomicosis infantil diagnosticados en centros de salud de la Gran Caracas, en niños con edades entre 0-15 años. Se evaluaron historias de niños con paracoccidioidomicosis, provenientes de hospitales de la Gran Caracas. Se revisaron 420 historias con diagnóstico de paracoccidioidomicosis, de las cuales 33 (7,9%) fueron niños menores de 15 años, siendo la media de edad 7,97 años. El género masculino predominó (69,7%), la razón masculino-femenino fue 1,5:1 en niños con edades de 0-7 años y 5,5:1 entre 8-15 años. La mayoría procedían del estado Miranda, 11 (35,5%) seguido del Distrito Capital 9 (29,1%). En 26 casos se clasificó la enfermedad, encontrando que 24 (92,3%) desarrollaron la forma aguda. Las principales manifestaciones clínicas precisadas en 25 historias fueron: fiebre 18 (72%) adenomegalias 16 (64%), hepatomegalia 12 (48,0%) y esplenomegalia 11 (44%). De 24 casos que tenían datos de laboratorio se observó que la eosinofilia y la anemia fueron los principales hallazgos. El diagnóstico micológico se realizó por serología en 24 (72,7%) casos, biopsia 11 (45,8%), examen directo 3 (12,5%) y cultivo 1 (4,2%). La paracoccidioidomicosis infantil es una entidad infrecuente, la cual se observa en 7,9% de los casos. Las manifestaciones más frecuentes son fiebre, adenomegalias y hepatoesplenomegalia. El diagnóstico de la paracoccidioidomicosis aguda infantil, siempre debe ser considerado en niños con edades de 0-15 años, en Venezuela.

Paracoccidioidomycosis rarely affects children, and it is not a notifiable disease. Its real impact in the child population is unknown. The aim of the study was to determine the number of paracoccidioidomycosis cases diagnosed in various health centers in Great Caracas, in children between 0-15 years. We reviewed 420 records with diagnosis of paracoccidioidomycosis from Hospital of Caracas. 33 (7,9%) were from children less than 15 years old. Age average 7,97 years. Male gender accounted for 69.7%, with a male: female relation of 1.5:1 in children between 0-7 years and 5,5:1 between 8-15 years. Most of the patients 11 (35,5%) came from Miranda state, followed bu Distrito Capital 9 (29,1%). In 26 patients the disease could be classified, from which 24 (92,3%) developed the acute form. Clinical manifestations, recorded in 25 cases were: fever 18 (72%), enlarged lymph nodes 16 (64%), hepatomegaly 12 (48,0%) and splenomegaly 11 (44%). From 24 cases in which laboratory data was recorded, eosinophilia and anemia were the most relevent findings. Mycological diagnosis was performed by serology in 24 (72,7%) cases, biopsy 11 (45,8%), direct examination 3 (12,5%) and culture 1 (4,2%). Child paracoccidioidomycosis is a rare disease, observed in 7, )% of cases. Most relevant clinical manifestations are fever, enlarged lymph nodes and hepatosplenomegaly. Acute paracoccidioidomycosis must be considered as a possible diagnosis in children between 0-15 years, in endemic countries such as Venezuela.

Estudio clínico-epidemiológico de la criptococosis en Venezuela: años 1994-2003 / Clinical-epidemological study of cryptococcosis in Venezuela: 1994-2003

La criptococosis es una enfermedad oportunista de distribución mundial. Frecuentemente es una infección definitoria de SIDA. El tratamiento antirretroviral ha disminuido su frecuencia. El impacto de esta entidad en Venezuela es desconocido. El objetivo de este trabajo es describir las características más relevantes de la criptococosis en nuestro país. Se revisaron 110 historias clínicas de pacientes hospitalizados con el diagnostico de criptococosis, entre 1994 y 2003, en 6 hospitales. Los datos recolectados incluyeron: características demográficas, clínicas, diagnósticas, terapéuticas y la evolución de los pacientes. Para el análisis se utilizaron los programas SPSS 10.0 y EpiInfo 6.04 (2001). Dentro de los 110 pacientes evaluados se incluyeron 17 protocolos de autopsia. Uno solo de los pacientes tenia 8 años de edad, el resto era mayor de 15 años. 91 eran del sexo masculino y 19 femenino. 91 (82,73 por ciento) tenían SIDA y 19 (17,27 por ciento) eran VIH negativo. En los pacientes con SIDA el valor promedio de CD4+ fue < 200 cel/mm³ y la carga viral era > 30000 copias/mL; 52 (57,14 por ciento) de los casos no tenían otra infección oportunista y 39 (42,86 por ciento) tenían otras condiciones asociadas, tales como tuberculosis (30,97 por ciento), neumocistosis (28,21 por ciento), y toxoplasmosis (20,51 por ciento). En los pacientes VIH negativo, el uso de esteroides (25 por ciento) fue el factor de riesgo predominante. Dos pacientes eran embarazadas. En 107 (57,27 por ciento) se encontró infección del SNC. 12 (13,19 por ciento) de los pacientes con SIDA tenían alteración de pares craneales. Se encontró afectación pulmonar en 4 (3,77 por ciento) pacientes, 1 de ellos con SIDA. La criptococosis fue la enfermedad definitoria de SIDA en el 61,54 por ciento de los casos. 33 (30 por ciento) de los pacientes fallecieron. En la mayoría de los pacientes la criptococosis se asoció a SIDA. A pesar de la eficacia del tratamiento antirretrovial, esta micosis es todavia ...

Cryptococcosis is an opportunistic disease of worldwide distribution. It is frequently an AIDS-defining infection. Antiretroviral treatment has reduced its occurrence. In Venezuela, the impact of this disease is unknown. The aim of this study is to describe the most relevant features of cryptococcosis in our country. 110 clinical records with a diagnosis of cryptococcosis hospitalized between 1994 and 2003 in 6 Venezuelan hospitals were analyzed. Data collected included demographic, clinical, diagnostic, therapeutic and outcome information. SPSS 10.0 software and EpiInfo 6, version 6.04 (2001) were used. 110 patients with cryptococcosis were enrolled, including 17 autopsy protocols. One was 8 years old, the rest were over 15. Nineteen were female and 91 male; 91 (82.73 percent) had AIDS, 19 (17.27 percent) were HIV negative. Among the AIDS patients, average CD4+ count was < 200 cel/mm3 and viral load was > 30000 copies/ml; 52 (57.14 percent) did not have other opportunistic infections or AIDS-related disease, and 39 (42.86 percent) had other associated conditions, such as tuberculosis (30.97 percent), PCP (28.21 percent) and toxoplasmosis (20.51 percent). In HIV negative patients, use of steroids (25 percent) was the predominant risk factor. Two patients were pregnant. 107 (57.27 percent) presented CNS infection; 12 (13.19 percent) with AIDS had cranial nerve alterations. Pulmonary disease was found in 4 (3.77 percent), of which one had AIDS. Cryptococcosis was an AIDS-defining infection in 61.54 percent of cases; 33 (30 percent) of the patients died. In most of the patients, cryptococcosis was associated with AIDS. In spite of the efficacy of antiretroviral treatment, this mycosis is still significant in Venezuela, perhaps due to late HIV infection diagnosis

Cryptococcus spp. en Venezuela y su relación con el biotipo del MicroScan® / Cryptococcus spp. in Venezuela and its relationship with the MicroScan® biotype

El lector del panel microbiológico automatizado autoScan®-4 detecta el crecimiento del hongo en diversos sustratos bioquímicos, presentes en los pozos de los paneles del MicroScan®. El propósito de este estudio fue relacionar el ¨biotipo¨ identificado por el MicroScan® con la especie causante de criptococosis, con el objeto de permitir una identificación en el menor tiempo posible. Se evaluaron 82 cepas de Cryptococcus spp. aisladas a partir de muestras clínicas entre 1995 y 2004. Para garantizar la pureza de las cepas, se realizó la identificación de las mismas por métodos convencionales; para identificar las especies se utilizó el medio L-canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB). Se utilizó también el panel de identificación rápida de levaduras del MicroScan®, con el fin de determinar el ¨biotipo¨. El MicroScan® reveló 27 diferentes ¨biotipos¨. De los 82 aislados tipificados con el uso del medio CGB, el 91,46 % correspondieron a C. neoformans y 8,54 % a C. gattii. No se encontró una diferencia significativa entre los ¨biotipos¨ y las especies (p>0,05). Sin embargo, se encontró significancia estadística entre las especies C. gattii y C. neoformans y la asimilación de p-nitrofenil-N-acetil-ß-D-glucosamina (NAG) (p<0,05). El panel de identificación rápida de levaduras del MicroScan® no fue capaz de diferenciar ambas especies.

The automated reader of the AutoScan® -4 microbiological panels detects fungi growth in various biological substrates present in the MicroScan® panel wells. The purpose of this study was to relate the biotype identified by the MicroScan® with the species causing the criptococcosis, in order to obtain identification in the shortest possible period. The evaluation included 82 Cryptococcus spp. strains isolated from clinical samples between 1995 and 2004. To guarantee the purity of the strains they were also identified by conventional methods; to identify the species we used L-canavanin-glycine-bromthymol blue medium (CGB). We also used the fast yeast identification MicroScan® panel with the purpose of determining the “biotype”. The MicroScan® revealed 27 different “biotypes”. Of the 82 isolates typed with the CGB medium, 91.46% corresponded to C. neoformans and 8.5% to C. gattii. No significant difference was found among the “biotypes” and the species (p<0,05). Nevertheless, there was a statistically significant difference between the assimilation of p-nitrophenil-N-acetyl-ß-D-glucosamine (NAG) (p<0.05) by the C. gattii and the C. neoformans species. The fast yeast identification MicroScan® panel was not able to differentiate between both species.

Determinación de un medio de cultivo apropiado para acelerar el crecimiento de paracoccidioides brasiliensis / Determination of an appropriate culture medium to accelerate the growth of paracoccidioides brasiliensis

A pesar de los avances de la tecnología en los últimos años, en una infección micótica la "prueba de oro" para realizar el diagnóstico definitivo, es el aislamiento del agente causal mediante la práctica del cultivo de una muestra clínica; por lo que a través de los años han sido elaborados numerosos medios de cultivo, en los cuales se han utilizado desde sustancias naturales, hasta otras artificiales de composición más compleja. El problema más importante al cual se enfrentan los laboratorios de micología médica, es que los hongos productores de micosis profundas en Venezuela, tienen la propiedad de ser de lento y difícil crecimiento, inclusive hasta 8 semanas son necesarias para poder visualizar estructuras características del agente investigado. Es por ello que es importante desarrollar un medio de cultivo que aumente la sensibilidad de recuperación de hongos dimorfos, como el P. brasiliensis, a partir de muestras clínicas y provenientes de la micoteca; y que a su vez pueda ser utilizado para la obtención de la fase de levadura en forma eficaz. Se procesaron dos muestras clínicas y dos cepas provenientes de la Micoteca de la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical, los cuales fueron sembrados en: Sabouraud, agar cerebro corazón (brain heat), agar Kelley y agar Kelley Modificado a temperatura ambiente para obtener la fase micelial y a 37° C para incluir la transformación térmica y así recuperar la fase de levadura. En relación al crecimiento a temperatura ambiente, de las muestras clínicas se observó el crecimiento de una colonia característica de P. brasiliensis entre el séptimo día y la sexta semana en el siguiente orden: agar Kelley, agar Kelley modificado, agar brain heart y Sabouraud. En el caso de dos cepas provenientes de la micoteca a su desarrollo fue casi similar en Agar Kelley y Brain heart. Para la transformación a fase de levadura ésta se obtuvo antes de los 7 días con el agar Kelley Modificado y el agar Kelley.

Identificación de histoplasma capsulatum en muestras clínicas mediante la técnica de PCR en dos rondas / Detection of histoplasma capsulatum by nested-PCR in clinical specimens

La histoplasmosis es una micosis profunda de distribución mundial cuyo diagnóstico se fundamenta en estudios clínicos, micológicos e inmunológicos. La identificación del agente etiológico en muestras biológicas es difícil de realizar. Se evaluó la técnica de PCR en dos rondas para identificar ADN de Histoplasma capsulatum en muestras clínicas (sangre y médula ósea) y cultivos del hongo. Se ensayaron 3 métodos de aislamiento de ADN basados en los reactivos Tiocianato de Guanidina, Cloruro de Bencilo y Triton-X-100. La técnica de aislamiento con Tiocianato de guanidina resultó de fácil aplicación en muestras clínicas. Sin embargo, se obtuvo un mayor rendimiento de ADN con el reactivo Triton-X-100. La aplicación de la prueba de PCR generó un amplificado de 210 pares de bases el cual fue identificado tanto en las cepas de referencia de H. capsulatum como en 5 muestras de sangre y 2 muestras de médula ósea. Para confirmar la especificidad de la prueba se analizaron cepas de otros hongos no relacionados, Paracoccidioides brasiliensis, Candida glabrata, Cryptococcus neoformans y Coccidioides immitis (C posadasii) las cuales resultaron negativas. La técnica de PCR mostró una sensibilidad de hasta 10pg de ADN de H. capsulatum confirmándose así su utilidad como herramienta de diagnóstico molecular.

El embarazo como única condición subyacente de una criptococosis: a propósito de 2 casos / The pregnancy like only underlying condition of a criptococosis: a purpose of 2 cases

Rara vez el embarazo ha sido asociado con criptococosis. Se presentan 2 pacientes VIH seronegativas, hospitalizadas en el Hospital Universitario de Caracas por presentar criptococosis meníngea, en las cuales la única condición subyacente fue el embarazo. Se hace una revisión de la literatura.

Estudio de 40 casos de Histoplasmosis en niños y revisión de la literatura / Study of 40 cases of histoplasmosis in children and literature review

En niños, la histoplasmosis es la micosis profunda más frecuente en nuestro país. No es de denuncia obligatoria, por lo que existe un gran subregistro. El objetivo de este trabajo es reportar los casos de histoplasmosis diagnosticados en niños en la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical (IMT). Universidad Central de Venezuela (UCV), entre julio 2004 y julio 2005, con la finalidad de dar a conocer los principales aspectos de esta entidad a la población médica, en especial a los pediatras. Se evaluaron los pacientes en edad pediátrica (0-18 años) que fueron traídos a la consulta de la Sección y las muestras biológicas que se recibieron en el lapso antes mencionado. Se realizó examen mitológico y se siguió la evolución con el tratamiento. Se encontraron 40 casos de histoplasmosis con edades comprendidas entre 14 días y 16 años, 15 del genero femenino y 25 del genero masculino. Seis eran menores de 1 año, la mayoría (25 casos) provenientes del Distrito capital. Dieciocho presentaron la forma de histoplasmosis diseminada de los cuales 4 fallecieron. Quince presentaron la forma pulmonar aguda y 5 meningitis crónica. Seis pacientes estaban desnutridos, 4 presentaron VIH y 4 tenían tuberculosis. En 18 pacientes se desconoce comorbilidad. Nueve pacientes tenían aumento de la VSG, 7 anemia, 5 leucopenia y 2 pancitopenia. Los datos epidemiológicos fueron sugestivos de histoplasmosis en todos los casos. Se reportaron 40 casos de histoplasmosis en niños, diagnósticados en la Sección de Micología Médica del IMT-UCV. La forma clínica más frecuente fue la histoplasmosis diseminada. Ante la presencia de niños con las características descritas, debe pensarse en histoplasmosis como diagnóstico diferencial, relacionando la epidemiología, clínica, radiología y exámenes de laboratorio. Es necesario practicar mitológico para confirmar la presencia de esta enfermedad.

Candida spp en pacientes VIH/SIDA / Candida spp in patient VIH/SIDA

La candidiasis es la infección fúngica más frecuente en pacientes VIH seropositivos y con SIDA, siendo C. albicans la especie que predomina. En estos pacientes, la candidiasis se manifiesta más comúnmente como orofaringitis, con una incidencia que oscila entre 45 por ciento y 95 por ciento de todos los casos. En Venezuela son pocos los reportes que existen acerca de esta entidad en pacientes VIH/SIDA, por lo cual uno de los objetivos de esta investigación fue evaluar este aspecto. Se estudió una cohorte de 402 pacientes con VIH/SIDA con o sin orofaringitis y con o sin tratamiento antifúngico. Las especies de Candida más importantes aisladas fueron: C. albicans (80,41 por ciento), C. tropicalis (8,78 por ciento), C. glabrata (4,90 por ciento), C. dubliniensis (3,26 por ciento). Se evaluó la susceptibilidad de los diferentes aislados a las drogas antifúngicas con el método de la NCCLS y el método de los pozos de difusión. El 37,5 por ciento C. albicans provenientes de pacientes con tratamiento antimicótico fueron resistentes al fluconazol (resistencia secundaria) y 23,95 por ciento mostraron también resistencia al itraconazol (resistencia cruzada). Los ailados obtenidos se tipificaron a través de la reacción en cadena de la polimera (RAPD) y se estableció la que la misma representa una técnica útil para diferenciar Candida spp. En esta cohorte de pacientes evaluados, las características clínicas y demográficas son similares a las reportadas mundialmente, y que desde la introducción del TARGA, la frecuencia de las infecciones por Candida spp disminuyó. Hasta la presente fecha, en Venezuela no se había reportado el hallazgo de C. dubliniensis (3,26 por ciento).

Candida dubliniensis en pacientes VIH/SIDA: en Venezuela / Candida dubliniensis in patient VIH/SIDA: in Venezuela

En los últimos años, las enfermedades producidas por hongos han ido en aumento, debido en gran parte a la aparicón del síndrome de inmunodeficiencia adquirida. El incremento de estas micosis ha sido más notable en aquellas causadas por especies del género Candida, las cuales trae consigo una elevada morbi-mortalidad. Otras especies no-albicans tales como, Candida tropicalis, Candida parapsilosis, Candida glabrata, Candida krusei, Candida lusitaniae, Candida guillermondii y más recientemente Candida dubliniensis pueden estar involucradas en cualquier tipo de candidiasis. Esta última especie presenta características fenotípicas similares a C. albicans, siendo una de la más resaltante la producción de abundantes clamidoconidias. Candida dubliniensis al estar estrechamente relacionada desde el punto de vista fenotípico con C. albicans, hace dificultosa su identificación, sobre todo con los métodos convencionales de laboratorio y usualmente se ha identificado erróneamente como C. albicans. Actualmente existen múltiples opciones para una identificación presuntiva de C. dubliniensis, como es el caso de la utilización de paneles de identificación automatizada, medios cromogénicos (CHROMagar Candida), el uso del agar Staib, la prueba de la termotolerancia, entre otros; adicionalmente se pueden utilizar métodos de biología molecular los cuales son más específicos y sencibles para realizar una identificación definitiva de C. dubliniensis, permitiendo así por primera vez, la identificación fenotípica y genotípica de C. dubliniensis y el reporte de casos de candidiasis orofaríngea originada por C. dubliniensis en pacientes virus de inmunodeficiencia humana/síndrome de inmunodeficiencia adquirida en nuestro país.

Identification of cryptococcus neoformans isolates using staib agar without creatinine

En micología, el cultivo es la mejor manera de realizar el diagnóstico definitivo de una micosis. Muchos tipos de medios han sido desarrollandos y modificados de tal fin, utilizando las propiedades bioquímicas de los hongos para reconocerlos. Este último ha sido ampliamente usado para identificación del género cryptococcus y en otros hongos. El objetivo de este estudio fue demostrar la utilidad del agar Staib y de un medio de Staib modificado, sin creatinina, en el aislamiento e identificación de hongos patógenos. Cuarenta y seis aislados de Cryptoccocus neoformans más un control fueron identificados por criterios morfológicos y bioquímicos, usando la prueba de ureasa (agar urea christensen) y cultivo en medio Sablac. Las cepas fueron transferidas a placas de agar Staib estandar y de agar Staib sin creatinina. Las placas fueron evaluadas a tempreratura ambiente (26-28ºC) durante una semana y luego fueron evaluadas las características morfolóficas de las colonias y producción de fenoloxidasa. En 43 (91.5 por ciento) de las cepas estudiadas se observó producción de fenoloxidasa (presencia de colonias marrones) tanto en el agar estandar como en el agar sin creatinina. El agar Staib sin creatinina es un medio excelente para identificación de C. neoformans, con las ventajas de un bajo costo y fácil preparación

Extracción simplificada de ADN en especies de Candida / DNA simplified extraction in Candida species

La pared de doble contorno de las levaduras hace difícil que se realice la lisis para la extracción del ADN genómico en Candida spp. Existen numerosos protocolos que se basan en métodos enzimáticos y/o físicos. Sin embargo son laboriosos y relativamente caros. El objetivo de este trabajo fue simplificar la extracción de ADN para usar el homogenato obtenido en la amplificación aleatoria de segmentos de ADN (RAPD) asimétrico con un cebador reverso corto CAND R de la secuencia repetitiva de C. albicans CARE 2. Mediante choque térmico se logró obtener suficiente cantidad de ADN de las diferentes especies de Candida para reproducir los diferentes patrones de bandas características de cada una de las especies.

Identificación de cryptococcus sp: mediante el auxonograma modificado por araujo / Identification of crytococcus sp: througgh the auxonogram method modified by araujo

Se identificaron 43 cepas de C. neoformas, mediante el uso de la prueba de auxonograma utilizando la técnica de Araujo, la cual es una modificación del método de Beijerinck. Los resultados obtenidos con esta técnica fueron similares a lo observado con la identificación automatizada con el MicroScan® DADE BEHRING. Los datos demostrados nos permiten afirmar que la técnica evaluada es efectiva, poco costosa y fácil de utilizar en un laboratorio de pocos recursos